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[摘要]目的 观察shRNA Twist基因对人绒毛膜癌细胞JEG-3增殖、侵袭和凋亡的影响。方法 以人源性绒毛膜癌细胞为种子细胞,构建shRNA-Twist小干扰RNA载体,通过慢病毒转染绒毛膜癌细胞,根据转染慢病毒质粒的不同分成3组,即空白对照组、空白质粒组和shRNA干扰组。RT-qPCR和Western Blot检测Twist和凋亡蛋白caspase-3和caspase-9的表达。Transwell法检测人绒毛膜癌细胞侵袭能力,CCK-8法检测人绒毛膜癌细胞增殖能力,AV-PI试剂盒检测人绒毛膜癌细胞凋亡水平。 结果 RT-PCR结果显示,空白质粒组的Twist的mRNA的相对表达量(与空白对照组相比)为(1.011±0.125);shRNA干扰组的Twist的mRNA的相对表达量(与空白对照组相比)为(0.377±0.021),高于空白质粒组的mRNA表达水平(P < 0.05)。Caspase-3和Caspase-9的mRNA含量具有同样的趋势。Western-Blot结果显示,空白质粒组和shRNA干扰组的的Twist蛋白相对表达量(与空白对照组相比)分别为(7.211±0.934)和(0.213±0.091),2组比较差异具有统计学意义(P < 0.05)。Caspase-3和Caspase-9的蛋白含量具有同样的趋势。空白对照组、空白质粒组和shRNA干扰组的Transwell结果比较具有明显的统计学差异(F = 23.983,P < 0.05)。shRNA干扰组与空白质粒组的Transwell结果比较具有明显的统计学差异(q =10.322,P < 0.05)。CCK-8和AV-PI检测结果具有同样的趋势。 结论 shRNA-Twist可以明显的抑制绒毛膜癌细胞的增殖和侵袭,促进细胞凋亡,可以作为绒毛膜癌新的治疗靶基因。 |
关键词: [关键词]Twist基因 绒毛膜癌 细胞增殖 细胞侵袭 细胞凋亡 |
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