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miR-145负向调控宫颈癌细胞株Hela中C-myc的表达
刘 洋1 ),黄娅娟2 ),孙春意2 ),许长俊2 ),杨莹莹2 ),周红林2 )1,2
1.(1)昆明医科大学第二附属医院生殖医学科;2.2)妇科,云南 昆明 650101)
摘要:
[摘要]目的 观察miR-145对宫颈癌Hela细胞C-myc表达的影响,探讨miR-145对C-myc的调控作用。方法 以RT-PCR检测法检测Hela细胞中miR-145和C-myc mRNA的表达。运用 West Blot检测法检测 C- myc蛋白的表达情况;设计并合成 miR-145的模拟物和 miR-145的抑制剂,以及两者的空白对照序列(模拟对照,抑制剂对照),用脂质体 Liposome2000分别包裹二者后以使其转染,同时设立空转 Liposome2000用作对照。转染后 24 h分别检测 C-myc mRNA和蛋白的表达变化。实验数据采用单因素方差分析和t检验进行统计分析。结果 Hela细胞中miR-145和C-myc的表达呈阳性。转染24 h后,模拟组,模拟对照组,抑制剂组,抑制剂对照组及脂质体组中C- myc mRNA相对表达水平分别为(0.40±0.32)、(0.59±0.18)、(1. 22±0.38)、(0.73±0.25)和(0.48±0.15);蛋白相对表达水平分别为(0.30±0.17)、(0.50±0.17)、(1. 35±0.59)、(0.71±0.14)和(0.72±0.29);模拟组C-myc的mRNA和蛋白相对表达水平显着低于模拟对照组和脂质体组(P<0.05)。而 C-myc的mRNA和蛋白在抑制剂组中的相对表达水平显着高于抑制剂对照组和脂质体组(P <0.05)。结论 人宫颈癌 Hela细胞株中, C- myc是 miR-145的靶基因, miR-145通过下调 C- myc mRNA及其蛋白的表达水平,发挥负向调控C-myc的作用。
关键词:  [关键词]miR-145  C-myc  宫颈癌  Hela  负性调控
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