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云南宣威肺腺癌细胞XWLC-05转染HLA-A*0201的抗肿瘤研究
邵文萍1
昆明医科大学第一附属医院临床医学实验研究科
摘要:
[摘要]目的 在云南宣威肺腺癌细胞XWLC-05中转染并表达外源性云南肺癌患者白细胞抗原(human leukocyte antigen, HLA)等位基因高频位点HLA-A*0201基因,以诱导肿瘤抗原特异性的细胞毒作用.方法 采用序列特异性引物扩增(PCR-SSP)法对XWLC-05细胞行HLA- DNA分型,脂质体转染法将真核质粒pcDNA3.1-HLA-A*0201导入XWLC-05细胞并用G418筛选阳性克隆,淋巴细胞分离液提取健康人外周血单个核细胞(PBMNCs)诱导培养为LAK细胞,免疫磁珠分选法提取出CD8+T淋巴细胞(CTLs),MTT法测试肿瘤特异性的细胞毒效应.结果 筛选出稳定表达HLA-A*0201基因的阳性克隆,免疫激活并分选出HLA-A*0201阳性的CTLs,该细胞对转染了HLA-A*0201基因的肿瘤细胞有更强的杀伤活性.结论 HLA-A*0201基因低表达或缺失,在导致肿瘤细胞免疫逃逸方面起重要作用,HLA-A*0201基因可诱导出HLA-A*0201限制的肿瘤特异性T淋巴细胞杀伤效应.
关键词:  [关键词]HLA-A*0201  基因转染  肿瘤细胞  LAK细胞
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