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细菌双杂交验证古菌UDG与TRX相互作用的研究
张 璐1
昆明医科大学细胞生物学与医学遗传学系
摘要:
[摘要]目的 验证别府硫化叶菌(Sulfolobus tokodaii,S.tokodaii)DNA碱基切除修复中重要的酶-尿嘧啶-DNA糖基化酶(uracil - DNA glycosylase, StoUDG)与硫氧还蛋白(thioredoxin, StoTRX)之间的相互作用,方法 将StoUDG和StoTRX的基因分别克隆到细菌双杂交载体上,共转化至报告菌株,从筛选平板上检测StoUDG和StoTRX相互作用的强弱.结果(1) pBT-TRX与pTRG-UDG等细菌双杂交质粒共转化至报告菌株,可使报告菌株在含氯霉素、四环素和卡那霉素的LB平板上生长;(2)含pBT-TRX与pTRG-UDG质粒的细菌双杂交报告菌株可在筛选平板上缓慢生长,且不发生自激活.结论 StoUDG与StoTRX存在较弱的相互作用,提示StoTRX参与依赖于StoUDG的DNA碱基切除修复过程,
关键词:  [关键词]细菌双杂交  DNA碱基切除修复  尿嘧啶-DNA糖基化酶  硫氧还蛋白
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